收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)

傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳

傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿

傳代方法

1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4.待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。

質(zhì)量檢測(cè)：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽(yáng)性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等

產(chǎn)品規(guī)格：5x105cells/T25或1mL凍存管

培養(yǎng)基：小鼠食管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%

產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右

運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）

供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用

1.準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2.布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3.處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。

4.剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液，然后一并倒入三角燒瓶中，結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。

5.消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6.分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速（500~1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7.計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2~7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8.培養(yǎng)：置于36.5℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶蓋需擰松半圈。

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白3抗體

細(xì)胞環(huán)氧化酶（CYCLOOXYGENASE-2）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

酶解法PCR清潔試劑盒

酵母菌SD-TRP/HIS/ADE培養(yǎng)基

石蠟切片組織INSULIN 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

通用型雞滑液支原體（MS）基因檢測(cè)試劑盒

糖一6一磷酸脫氫酶（G6PD）定量檢測(cè)試劑盒

通用性甲羥戊酸（mevalonate）含量高效液相層析-質(zhì)譜法定量檢測(cè)試劑盒

體內(nèi)（in vivo）超氧化物陰離子熒光法定量檢測(cè)試劑盒

髓性過(guò)氧化酶活性染色試劑盒

動(dòng)物細(xì)胞醛酮還原酶1E（aldo-keto reductase 1E）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞P35蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒

植物果聚糖化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒

溴酚藍(lán)（BROMPHENOL BLUE）溶液（100毫克/毫升）

細(xì)胞Akt/PKB激酶總活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

純化線粒體腫脹比色法測(cè)定試劑盒

整合素αVβ3抗體

干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1/神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白PC4抗體

熱休克蛋白90單克隆抗體

KREMEN1蛋白抗體

細(xì)胞色素P450 17抗體

β內(nèi)酰胺酶樣蛋白抗體

類(lèi)固醇5α還原酶1抗體

小鼠食管成纖維細(xì)胞BCL2相關(guān)蛋白A1抗體