傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

ZR-75-1人乳腺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用。可根據(jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GGT2 heavy chain： γ谷酰轉肽酶2重鏈抗體 LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細胞)5×106cells/瓶×2 人血凝素(HA)ELISA 試劑盒 IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗IgM 0.1ml

GGT5 heavy chain： γ-谷酰轉肽酶5重鏈抗體 Hela, 人細胞系 Human

HBdSMC Pellet 人膀胱平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人腦膜細胞cDNAHMC cDNA 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA 試劑盒 IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗IgM 0.1ml

phospho-GATA3 (Ser115)： 0酸化GATA結合蛋白3抗體 人神經(jīng)膠質細胞瘤細胞;U251

MDC1： DNA損傷關卡蛋白1抗體 FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-R124大鼠脈絡膜血管細胞培養(yǎng)基100mL 大鼠神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 PEDF  大鼠色素上皮衍生因子 96T

Nebulin： 伴肌動蛋白抗體 正常大鼠腎細胞;NRK-52E

U14-GFP(小鼠子細胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型膠質瘤細胞) 大鼠神經(jīng)降壓肽()ELISA試劑盒 TSGF(Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor)  小鼠特異生長因子/相關因子 96T

NDRG4： 抑癌基因NDRG4抗體 VERO細胞衍生株;SVP

ZR-75-1人乳腺癌細胞ICOS ligand： 誘導協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 PRMT6 Others Human 人 PRMT6 / HRMT1L6 人細胞裂解液 (陽性對照)

人心肌細胞-RNAHCM-a miRNA5 μg 人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA 試劑盒 Tubulin- Gamma 微管蛋白-γ抗原 0.5mg

IBDV： 雞傳染性法氏囊病病毒抗體 人纖維肉瘤細胞;HT-1080

SVEC4-10(小鼠淋巴結內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 人Clara細胞分泌蛋白(CC-SP)ELISA試劑盒 TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原 0.5mg

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