RWPE-1人正常前列腺上皮細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

hCD34+-CB-c single donor 從臍帶血提取的人類CD34+祖細(xì)胞(hCD34+-CB)，單一來源 100000 人卵巢成纖維細(xì)胞HOF 兔銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA 試劑盒 IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

Factor XI light chain： 11輕鏈抗體 山羊皮膚成纖維樣細(xì)胞;DG-S1

H-97(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA 試劑盒 IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.3ml

Factor XII heavy chain： 12重鏈抗體 小鼠垂體細(xì)胞(MPC)(5×105)

人胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1 兔腎素(Renin)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

MKLP2： 有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4

P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 L6(大鼠成肌細(xì)胞) 大鼠尾加壓素2受體(S2R)ELISA試劑盒 HBcAb(Mouse hepatitis B virus core antibody)  小鼠乙型肝炎核心抗體 615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7912

IL18BP Protein Mouse 重組小鼠 IL18BP 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠維受體應(yīng)答蛋白2(RARRES2)ELISA試劑盒 HBeAb(Mouse hepatitis B virus e antibody)  小鼠乙型肝炎e抗體 CDK7 & CCNH & MNAT1 Others Human 人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠維受體α(RARα)ELISA試劑盒 F XII  大鼠Ⅻ 96T

MDFIC： 肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體 Eca-109細(xì)胞，食管癌細(xì)胞 人食管鱗癌,KYSE 150細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A

RWPE-1人正常前列腺上皮細(xì)胞Rhesus antibody Rh CCR-3 細(xì)胞表面趨化因子受體3抗體 HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人臍帶單核細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人超敏生長激素(U S-GH)ELISA 試劑盒 Integrin Alpha3 整合素α3抗原 0.5mg

Phospho-IRF3 (Ser396)： 0酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3 0.1ml

Rhesus antibody Rh CCR4/CD194 細(xì)胞表面趨化因子受體4抗體 猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4- 慢性髓原白血病，K562細(xì)胞 BxPC-3(原位胰腺腺癌細(xì)胞)

IL13 Others Mouse 小鼠 IL13 / ALRH 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)ELISA 試劑盒 Integrin Beta5 整合素β5抗原 0.5ml

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。