HuH-6人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FRMD3： FRMD3蛋白抗體 小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1 小鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

PDGFRB Others Cynomolgus 食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒 IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml

FRMD4B： FRMD4B蛋白抗體 人十二脂腸腺癌;HuTu-80

95-C細(xì)胞，人低轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 大鼠腎小管上皮細(xì)胞，NRK細(xì)胞 CL-0154MDCK(犬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗IgG 0.1ml

FRMD7： FRMD7蛋白抗體 FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠血管生成素1(ANGPT1)ELISA試劑盒 VCAM-1/CD106 (Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1)  兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 96T

MMP-1： 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 K-562細(xì)胞，慢性髓原白血病細(xì)胞 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H446細(xì)胞 人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-13

TWSG1 Others Mouse 小鼠 TWSG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 Peanut agglutinin,PNA  花生凝集素 96T

phospho-MEF2C(Thr300)： 0酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5

MCF 10A人正常上皮細(xì)胞 MCF 10A of normal human mammary epithelial cells MEGM Bullet Kit(Clonetics Corparation CC-3150)+100ng/ml choleratoxin(Sigma C8052) 大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒 BCGF(Human B cell growth protein)  人B細(xì)胞生長因子 96T

HuH-6人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA 試劑盒 CLDN1(Claudin 1) 緊密連接蛋白1抗原 0.5mg

phospho-HSF1(Ser303)： 0酸化熱休克因子1抗體 人尿道上皮細(xì)胞裂解物HUCL

ANGPTL2 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL2 / Angiopoietin-like 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 人骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒 Claudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原 0.5mg

phospho-HSF1(Ser307)： 0酸化熱休克因子1抗體 IL27 Others Human 人 IL27 / Ierleukin-27 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA 試劑盒 CLDN1(Claudin 1)C-term 緊密連接蛋白1抗原(C端) 0.5mg

注意事項(xiàng)：

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。